山柰酚通过mTOR通路诱导细胞自噬保护帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元

作者：刘展; 蔡美云; 庄文欣; 吕娥; 吴正艳; 王虹玉; 宋乐乐; 付文玉^*

来源：中药新药与临床药理, 2022, 33(04): 446-453.

DOI：10.19378/j.issn.1003-9783.2022.04.005

• 山柰酚
• 细胞自噬
• 多巴胺能神经元
• 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路
• 帕金森病
• 小鼠

目的 探讨山柰酚通过抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路诱导细胞自噬，发挥对帕金森病模型小鼠黑质多巴胺能神经元的保护作用机制。方法 将24只C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组、模型组、山柰酚组。山柰酚组小鼠按50 mg·kg-1剂量灌胃给药，每日1次，连续14 d，对照组、模型组给予等体积生理盐水。于灌胃第9天采用腹腔注射MPTP(25 mg·kg-1)法建立帕金森病小鼠模型，连续造模5 d。采用爬杆实验和悬挂实验检测小鼠的行为学变化；采用透射电镜观察小鼠黑质多巴胺能神经元的超微结构改变；采用免疫组织化学法检测小鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH)、自噬微管相关蛋白轻链3(LC3)、自噬效应蛋白(Beclin-1)、泛素结合蛋白(p62)的表达；采用Western Blot法检测小鼠黑质TH、Beclin-1、LC3、p62、活化半胱氨酸蛋白酶3(cleaved Caspase-3)、mTOR、p-mTOR的蛋白表达水平。结果 与正常组比较，模型组小鼠的调头时间和爬杆总时间均明显延长(P<0.05,P<0.01)，悬挂总积分明显降低(P<0.05)；黑质多巴胺能神经元内线粒体内有空泡样变性；黑质内TH、Beclin-1、LC3蛋白表达明显下调(P<0.05,P<0.01),p62、cleaved Caspase-3、p-mTOR/mTOR蛋白表达明显上调(P<0.05,P<0.01)。与模型组相比，山柰酚组小鼠的调头时间和爬杆总时间明显缩短(P<0.05)，悬挂总积分明显升高(P<0.05)；多巴胺能神经元核膜及线粒体受损显著改善，胞内可见自噬体；黑质内细胞TH、Beclin-1、LC3蛋白表明显上调(P<0.05,P<0.01),p62、cleaved Caspase-3、p-mTOR/mTOR蛋白表达明显下调(P<0.05,P<0.01)。结论 山柰酚可能通过抑制mTOR信号通路诱导细胞自噬发挥对多巴胺能神经元的保护作用。

• 单位
  基础医学院; 潍坊医学院