青稞蛋白降血糖肽的纯化、结构鉴定及体外降血糖和抗氧化活性

作者：陶瑾; 张莉方; 徐宁莉; 朱雪洋; 张国强^*

来源：中国粮油学报, 2023, 38(11): 92-99.

DOI：10.20048/j.cnki.issn.1003-0174.000629

• 青稞肽
• 响应面优化
• 降血糖活性
• 抗氧化活性
• 分离纯化
• 结构鉴定

原料取青稞蛋白，通过单因素和响应面实验，以α-葡萄糖苷酶抑制活性为主要测定指标，筛选最适蛋白酶及最佳工艺条件。采用超滤和Sephadex G-15凝胶层析技术对水解肽进行分离纯化。通过液质联用获得具有较高降血糖活性的肽序列并对其氨基酸序列进行分析。结果表明：水解最适蛋白酶为胰蛋白酶，最佳水解条件参数为加酶量为12 000 U/g、底物质量浓度为3 g/100 mL、酶解时间为5 h。该条件下水解液α-葡萄糖苷酶抑制活性达70.96%。水解液经过超滤获得最佳组分E-4,Sephadex G-15凝胶层析得到最优组分E-43,其对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的半抑制浓度值(IC50)分别为0.26、6.74 mg/mL;其对ABTS+、DPPH自由基清除能力的半抑制浓度值分别为2.62、4.23 mg/mL。经液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定，其氨基酸序列为Gly-Phe-Ser-Gly-Ser-Gly-Gly-Lys、Gly-Val-Gly-Ala-Gly-Ala-Ala-Arg,荷质比m/z为348.67、329.68,分子质量为695.32、657.36 u,具有降血糖和抗氧化活性的2条八肽中N端均为亲水氨基酸，C端均为碱性氨基酸，且均含亲水、疏水和碱性氨基酸。

• 单位
  安徽工程大学