猪囊尾蚴AgB基因的克隆表达及其免疫学特性分析

作者：郭爱疆; 才学鹏; 海岗; 窦永喜; 贾万忠; 骆学农; 张少华; 景志忠

来源：免疫学杂志, 2008, (05): 515-518.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20080137

• 猪囊尾蚴AgB基因
• 原核表达
• 纯化 Cysticercus cellulosae AgB gene
• Prokaryotic expression
• Purification

目的克隆猪囊尾蚴AgB基因并在大肠杆菌中表达,为研制猪囊尾蚴病诊断试剂和基因工程疫苗奠定基础。方法从猪囊尾蚴虫体中提取总RNA,利用反转录聚合酶链式反应及重叠延伸PCR法扩增AgB完整序列,并克隆到原核表达载体pGEX-4T-1,在大肠杆菌中诱导表达。通过SDS-PAGE、Western-blotting检测AgB的表达和免疫反应活性。通过对包涵体的洗涤、纯化及变复性研究,纯化目的蛋白。采用ELISA法检测纯化蛋白检出猪囊尾蚴阳性血清率和免疫小鼠血清中抗猪囊尾蚴抗体的水平。结果测序证实扩增出AgB基因序列并正确插入到原核表达载体。表达质粒在大肠杆菌BL21中高效表达。纯化的目的蛋白,具有良好的...

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 中国农业科学院兰州兽医研究所