负载膜联蛋白A2(annexin A2)的间充质干细胞来源外泌体减少M2巨噬细胞极化抑制裸鼠前列腺癌细胞生长

作者：田野; 郭小鹏^*; 成俊; 王鹏

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2023, 39(02): 109-116.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.009564

• 前列腺癌
• 膜联蛋白A2(ANXA2)
• 外泌体
• 巨噬细胞极化

目的 探究负载膜联蛋白A2(ANXA2)的骨髓间充质干细胞(BMSC)来源的外泌体(Exo-ANXA2)对前列腺癌细胞增殖、侵袭与迁移以及前列腺癌移植瘤生长的影响，并研究巨噬细胞是否参与该过程。方法 分离与培养BALB/c裸鼠BMSC,采用负载ANXA2的慢病毒质粒感染BMSC,并分离外泌体；加入外泌体处理THP-1巨噬细胞，ELISA检测细胞上清培养液肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、 IL-6和IL-10的水平；将外泌体处理的巨噬细胞与前列腺癌细胞共培养后，CCK-8法检测细胞增殖活性，TranswellTM小室检测细胞侵袭与迁移。通过注射PC-3人前列腺癌细胞构建前列腺癌裸鼠移植瘤模型，将建模后的裸鼠随机分为对照组和实验组，每组8只，实验组裸鼠尾静脉注射1 mL Exo-ANXA2,对照组注射等量PBS,于注射后第0、 3、 6、 9、 12、 15、 18、 21天，使用游标卡尺测量计算肿瘤体积，21 d处死裸鼠并测量肿瘤组织质量，免疫组织化学染色法检测肿瘤组织中抗原KI-67(ki67)和CD163表达。结果 骨髓分离的细胞表面CD90和CD44呈高表达，CD34和CD45呈低表达，且成骨成脂分化能力较强，成功获得BMSC;负载ANXA2的慢病毒质粒感染后，BMSC中有较强的绿色荧光蛋白表达，并成功分离到Exo-ANXA2;经Exo-ANXA2处理后，THP-1细胞中TNF-α和IL-6的水平显著升高而IL-10和IL-13的水平显著下降；Exo-ANXA2处理巨噬细胞后，显著抑制Exo-ANXA2促进PC-3细胞增殖活性、侵袭与迁移的作用；经过给予前列腺癌移植瘤裸鼠注射Exo-ANXA2后，裸鼠在第6、 9、 12、 15、 18、 21天的肿瘤组织体积显著减小，21 d时裸鼠肿瘤体质量也显著减少，此外，肿瘤组织内ki67和CD163的阳性表达率均显著降低。结论 Exo-ANXA2能够抑制前列腺癌细胞增殖、侵袭与迁移，并抑制裸鼠前列腺癌移植瘤生长，M2型巨噬细胞减少。

• 单位
  新疆医科大学; 维吾尔自治区中医医院