硫醇转移酶(TTase)对紫外线诱导氧化损伤的人晶状体上皮细胞的保护作用

作者：郑晓亮; 张婕; 严宏

来源：眼科新进展, 2017, 37(07): 601-604.

DOI：10.13389/j.cnki.rao.2017.0153

• 硫醇转移酶
• 紫外线辐射
• 人晶状体上皮细胞
• siRNA

目的探讨硫醇转移酶(thioltransferase,TTase)对紫外线诱导氧化损伤的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)的保护作用。方法将体外培养的HLEC随机分为4组。正常组:正常培养的HLEC;紫外线组:正常培养的HLEC+紫外线(波长302 nm、辐照强度55.56μW·cm-2的紫外线照射15 min,辐照量共计500 J·m-2);TTase siRNA组:TTase siRNA转染的HLEC;TTase siRNA+紫外线组:TTase siRNA转染的HLEC+紫外线(照射参数同紫外线组)。应用乳酸脱氢酶释放试剂盒检测细胞的增殖能力;测定TTase酶活性及Western blotting检测TTase蛋白表达;测量细胞内总GSH、GSH与GSSG含量,计算GSSG与总GSH的比值。结果紫外线组较正常组细胞增殖能力下降21.0%(P<0.05),TTase siRNA组较正常组细胞增殖能力下降17.0%(P<0.05);TTase siRNA+紫外线组较正常组细胞增殖能力下降29.0%(P<0.05)。紫外线组TTase活性较正常组升高,约为正常组的2.1倍;siRNA组较正常组TTase活性下降,约为正常组的67.0%(P<0.05);TTase siRNA+紫外线组较TTase siRNA组TTase活性增加,约为TTase siRNA组的1.3倍(P<0.05)。与正常组相比,紫外线组TTase相对表达量升高,约为正常组的3.9倍,TTase siRNA组的TTase相对表达量明显降低,约为正常组的35.0%(P<0.05);而TTase siRNA+紫外线组的TTase相对表达量较TTase siRNA组升高,约为TTase siRNA组的3.0倍(P<0.05)。相比于正常组,紫外线组、TTase siRNA组及TTase siRNA+紫外线组GSSG含量均上升,分别为正常组的2.3倍、1.4倍和3.7倍(均为P<0.05);紫外线组、TTase siRNA组和TTase siRNA+紫外线组GSH含量较正常组下降,分别为正常组的68.4%、79.0%和61.7%(均为P<0.05)。紫外线组、TTase siRNA组和TTase siRNA+紫外线组GSSG/总GSH比值均较正常组增加,分别为正常组的3.1倍、1.7倍和5.2倍(均为P<0.05)。结论 TTase对紫外线诱导氧化损伤的人晶状体上皮细胞均有重要的保护作用。

• 单位
  唐都医院; 第四军医大学