云南栘[木衣] ISSR-PCR反应体系的建立及引物筛选

作者：刘宇; 朱泽莉; 彭劲谕; 王大玮; 段安安

来源：分子植物育种, 2021, 1-16.

• 云南栘[木衣]
• ISSR-PCR
• 正交设计
• 引物筛选

为了建立适合云南栘[木衣]的ISSR-PCR反应体系，本研究通过L16(45)正交设计对影响PCR扩增反应的5个因素(模板DNA， 引物， Mg2+， dNTPs， Taq DNA聚合酶)进行优化；在建立反应体系的基础上，筛选出多态性高的引物并确定其退火温度。结果表明，在25 μL反应体系中，最佳反应体系用量为模板DNA 20 ng、引物0.3 μmol/L、Mg2+ 1.5 mmol/L、dNTPs 0.15 mmol/L、Taq DNA聚合酶1.5 U。建立的反应体系扩增稳定，筛选出的11条引物多态性较好、条带清晰。本研究反应体系的建立可为云南栘[木衣]遗传多样性研究提供技术支持。

• 单位
  西南林业大学