摘要
目的 探讨宫颈鳞状细胞癌(CSCC)中PIWI相互作用RNA(piR)-823的表达、与临床病理特征的关系及对侵袭、转移的影响。方法 收集2019年1月至2021年12月95例CSCC手术切除标本及配对癌旁组织。采用piRNA表达谱芯片技术获取5例CSCC中差异表达的piRNA表达谱。在宫颈癌细胞株C33A和HeLa中分别转染piR-823-mimic质粒(piR-823过表达组)、阴性对照质粒(对照组)、si-piR-823质粒(piR-823干扰组)和si-对照组质粒(si-对照组)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测piR-823表达水平,Transwell小室实验检测piRNA-823对CSCC细胞侵袭的影响。生物信息学预测piR-823下游靶基因,采用qPCR和Western blotting检测piR-823表达水平对靶基因mRNA和蛋白表达的影响。裸鼠肺转移成瘤实验观察piR-823对CSCC细胞肺转移的影响。结果 CSCC的piRNA表达谱中符合条件且表达上调的piRNA共有5个,在95例CSCC组织中piR-823和piR-37390表达上调得到了验证,选择上调倍数更高的piR-823作为研究对象。piR-823表达与CSCC病理分级和淋巴结转移有关(P<0.05),而与年龄、HPV感染、肿瘤大小和TNM分期无关(P>0.05)。Transwell小室实验显示,过表达piR-823能促进CSCC细胞的侵袭,而干扰piRNA-823表达能抑制CSCC细胞的侵袭(P<0.05)。qPCR和Western blotting检测显示,过表达piR-823抑制了其下游靶基因磷酸甘油酸脱氢酶(PHGDH)的mRNA和蛋白表达,而干扰piR-823表达则提高了PHGDH的mRNA和蛋白表达(P<0.05)。裸鼠肺转移成瘤实验表明,干扰piR-823表达后肺转移瘤数目明显减少(P<0.05)。结论 在CSCC组织中piR-823表达水平上调。piR-823可能通过抑制PHGDH的mRNA和蛋白表达,从而促进了CSCC细胞的侵袭和转移。
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单位扬州大学; 扬州市妇幼保健院