科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的 探索TRIM21在SLE发病中的作用。方法 选取昆明医科大学第二附属医院风湿免疫科2020年10月—2020年12月间的35例SLE患者(缓解期17例、活动期18例)及健康对照18例。用qPCR检测受试者外周血单个核细胞(PBMC)中Toll样受体(TLR)9、E3泛素连接酶TRIM21、NF-κB和干扰素调节因子8(IRF8)的mRNA表达量，ELISA实验检测血清中IFN-γ、TNF-α、IL-6和IL-17A的水平；利用基因重组技术构建TRIM21下调表达的重组质粒载体，用慢病毒包装(sh-TRIM21)分别感染THP-1/Jurkat细胞，筛选出稳定细胞系作为研究组，空载质粒转染的THP-1/Jurkat细胞作为对照(NC组),用TLR9激动剂刺激两组细胞，用qRT-PCR分别检测刺激前后细胞中IκBα和p65蛋白、NF-κB mRNA和IRF8 mRNA表达水平；ELISA实验检测上清液中IFN-γ、TNF-α、IL-6和IL-17A的表达；用细胞因子IFN-γ/TNF-α分别处理两组细胞，刺激后8 h和24 h后检测细胞内TRIM21 mRNA表达水平。结果 缓解期、活动期SLE患者PBMC中TLR9、TRIM21和NF-κB表达量明显高于健康对照组(P<0.05),IRF8表达量低于健康对照组(P<0.05);缓解期与活动期组之间差异无统计学意义(P>0.05);TRIM21 mRNA表达量在抗TRIM21和抗ds-DNA抗体阳性与阴性组之间差异无统计学意义；SLE组TRIM21 mRNA表达量与白细胞计数呈正相关；在抗TRIM21抗体阳性SLE组，TRIM21 mRNA表达量与血清中IFN-γ、TNF-α的水平呈正相关。未给予TLR9激动剂刺激时，在THP-1/Jurkat细胞中，sh-TRIM21组与NC组比较，IκBα降解增多，核内p65增多，NF-κB mRNA和IRF8 mRNA表达水平升高(P<0.05);细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-6和IL-17A的水平均增高(P<0.05)。给予TLR9激动剂刺激24 h后，sh-TRIM21组与NC组比较，IκBα及核内p65变化不明显，NF-κB mRNA转录水平没有显著性增强，而IRF8 mRNA水平较刺激前明显增高，且sh-TRIM21组明显高于NC组。用IFN-γ、TNF-α处理THP-1/Jurkat细胞8 h和24 h后，sh-TRIM21及NC组TRIM21的表达较刺激前均显著上调(P<0.05)。结论 TRIM21参与SLE发病过程；在生理状态下，TRIM21可抑制NF-κB活化，降低其下游细胞因子水平；IFN-γ、TNF-α可诱导TRIM21表达，即使在TRIM21被敲低的状况下；TRIM21可能通过IRF8参与SLE发病过程。
- 单位
