高拷贝pPIC6HK-α-hEGF表达载体构建及其在毕赤酵母中的表达与鉴定

作者：吕彩云; 陈艳荣; 柏晓辉

来源：安徽科技学院学报, 2020, 34(04): 22-29.

DOI：10.19608/j.cnki.1673-8772.2017.0799

• α-hEGF
• 重组毕赤菌株
• 构建
• 表达

目的:为提高毕赤酵母对hEGF外源表达量,旨在为hEGF规模化生产及临床应用打下良好基础。方法:以构建载体pPIC6HK为基础,插入多份α-hEGF基因拷贝表达框,构建pPIC6HK-α-hEGF表达质粒,并电转入毕赤酵母后筛选高转化子,经发酵获得分泌表达目的蛋白,通过ELISA进行定量检测。结果:筛选到高拷贝转化子阳性菌株表达α-hEGF蛋白含量分别为133.61μg/mL和174.88μg/mL。结论:成功构建了高拷贝表达载体,α-hEGF在毕赤酵母GS115细胞中高效表达。

• 单位
  黄山学院