RHD mRNA替代剪接区域研究

作者:徐红先; 何颖军; 吴筱莹; 庄轶轩; 邹昕; 邵超鹏
来源:医学分子生物学杂志, 2012, 9(1): 53-55.
DOI:10.3870/j.issn.1672-8009.2012.01.011

摘要

目的 2007年国内报道一例弱D型个体存在第4~9外显子选择性剪接的转录子,我们探讨正常Rh(D)阳性个体的RHD基因mRNA的选择性剪接区域.方法 随机选择3名Rh(D)阳性个体,从新鲜全血中提取总RNA,通过特异性引物,采用"一步法"逆转录-PCR(RT-PCR),扩增RHD mRNA第1~7外显子区域,以及第6~10外显子区域,然后cDNA琼脂糖凝胶电泳和成像分析.结果 未发现第1~7外显子区域存在mRNA的选择性剪接条带,仅存在由特异性引物所扩增的第1~7外显子全长的序列条带;而第6~10外显子区域观察到5种替代剪切条带,序列分析显示分别为无缺失片段,以及完整缺失第7、第9、第7和9、第7~9外显子5种RHD转录子.结论 正常Rh(D)抗原阳性个体的RHD基因mRNA的选择性剪接仅存在于第7~9外显子区域.

全文