Sirt1基因敲除对5/6肾切除诱导的小鼠慢性肾脏病及VEGF/Flk-1信号通路的影响

作者：刘岳; 黄新忠; 李培培; 薛海燕; 陈晓岚; 施辉; 范亚平

来源：中华肾脏病杂志, 2017, 33(05): 371-377.

• 肾切除术
• 肾功能不全,慢性
• 血管内皮生长因子类
• 转化生长因子β
• 抗衰老酶
• Sirt1蛋白

目的探讨5/6肾切除诱导的肾脏纤维化小鼠中沉默信息调节因子2同源体1(Sirt1)基因敲除的影响及其对血管内皮生长因子(VEGF)/胎肝激酶1(Flk-1)信号通路的作用。方法雄性8周龄Sirt1+/+野生型小鼠及Sirt1+/-杂合子小鼠按随机数字表分为4组:Sirt1+/+假手术组(WT-Sham组,n=6)、Sirt1+/-假手术组(KO-Sham组,n=6)、Sirt1+/+5/6肾切除组(WT-Nx组,n=6)、Sirt1+/-5/6肾切除组(KO-Nx组,n=6)。代谢笼收集24 h尿液检测尿蛋白含量,收集血和肾组织标本检测血肌酐、尿素氮以及肾脏组织病理改变。免疫组化检测各组小鼠肾组织Sirt1、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、转化生长因子β(TGF-β)的表达;实时定量PCR和Western印迹分别检测肾组织Sirt1、纤连蛋白(Fibronectin)、CollagenⅠ、VEGF、Flk-1 mRNA和蛋白表达。结果 Sirt1+/+小鼠中Sirt1在肾小球内皮细胞、足细胞、系膜细胞及肾小管上皮细胞均有表达,而Sirt1+/+小鼠Sirt1表达强度降低。WT-Nx组小鼠术后12周24 h尿蛋白量、血尿素氮、血肌酐、肾小球硬化指数和肾小管间质纤维化指数均高于WT-Sham组(均P<0.01),而KO-Nx组小鼠术后12周上述指标比WT-Nx组更高(均P<0.01)。与WT-Sham组比较,WT-Nx组肾组织Fibronectin、CollagenⅠ和TGF-β表达均上调(均P<0.01);而KO-Nx组比WT-Nx组更高(均P<0.01)。WT-Nx组肾组织VEGF、Flk-1 mRNA和蛋白表达均低于WT-Sham组(均P<0.01);而KO-Nx组VEGF、Flk-1表达比WT-Nx组更低(均P<0.05)。结论 Sirt1基因敲除可进一步增加5/6肾切除小鼠术后的尿蛋白量和血肌酐,加重肾脏病理和肾脏纤维化,其作用机制可能与抑制VEGF/Flk-1信号通路有关,提示Sirt1可能是慢性肾脏病潜在的干预靶点。

• 单位
  南通大学附属医院