牛γ-干扰素在大肠杆菌中的表达及抗原性鉴定

作者：刘巧荣; 孙明; 乔明明; 杨璐; 申屠芬琴; 马永缨; 曹振; 田克恭; 陈西钊

来源：中国比较医学杂志, 2012, (02): 38-42.

• 牛γ干扰素
• 原核表达
• 抗原性
• 大肠杆菌 Bovine interferon-γ
• Prokaryotic expression
• Antigenicity
• E.coli

目的在大肠杆菌中高效表达牛γ-干扰素(bovine interferon-γ,BovIFN-γ),并对其生物活性进行初步鉴定。方法依据GenBank上基因序列人工合成BovIFN-γ基因,PCR方法扩增该基因,将其插入PET-28a载体构建原核表达质粒,转化大肠杆菌BL21中,在IPTG诱导下表达BovIFN-γ,并进行Western blot鉴定。Ni-NTA亲和层析法和电洗脱方法纯化表达的重组蛋白,用Western blot和商品化的BovIFN-γ检测试剂盒进行重组蛋白的抗原性检测。结果成功构建了BovIFN-γ原核表达载体PET-28a-BIFN-γ,并在大肠杆菌中高效表达,表达蛋白约...

• 单位
  中国动物疫病预防控制中心