Smad4小分子干扰RNA对转化生长因子-β诱导的纤溶酶原激活物抑制剂-1表达的影响

作者：郭宝良; 仲雷; 闫朝歧; 张建国; 邹小明; 杨宝峰

来源：中华实验外科杂志, 2009, (08): 1018-1020.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2009.08.024

• 纤溶酶原激活抑制因子-1
• RNA干扰
• Smad
• 转化生长因子-β

目的探讨Smad4小分子干扰RNA(siRNA)对转化生长因子(TGF)-β诱导纤溶酶原激活物抑制剂(PAI)-1的表达的影响及作用机制。方法将Smad4 siRNA转染入肝星状细胞24h后行TGF-β(1μg/L)刺激,24、48 h后收集细胞。利用萤光素酶报告基因法测定Smad结合转写因子的活性;Northern印迹分析技术检测PAI-1 mRNA表达的变化;Western印迹分析观察Smad4蛋白、PAI-1蛋白的变化。结果Smad4 siRNA能抑制Smad4蛋白(3.0±0.1比16.0±0.5)表达;Smad4 siRNA抑制TGF-β1和ALK5激活的4×SBE荧光素酶报告基因活性;TGF-β时间依赖性促进PAI-1 mRNA表达,24 h达高峰;Smad4 siRNA从mRNA(1.3±0.1比6.5±0.2)和蛋白(1.50±0.15比5.52±0.36)水平抑制TGF-β激活的PAI-1的表达。结论Smad4 siRNA能够有效地阻断TGF-β诱导的PAI-1表达。

• 单位
  哈尔滨医科大学附属第二医院