基于绵羊无浆体Groel基因的PCR方法的建立

作者：赵姗姗; 彭永帅; 王坤轮; 闫亚群; 菅复春; 宁长申^*

来源：河南农业大学学报, 2019, 53(06): 891-895.

DOI：10.16445/j.cnki.1000-2340.20191120.005

• 绵羊无浆体
• 无浆体病
• Groel基因
• 聚合酶链式反应

利用绵羊无浆体(Anaplasma ovis)高度保守的Groel基因,建立了快速、特异、敏感的绵羊无浆体检测方法。根据Gen Bank上登录的绵羊无浆体Groel基因序列(FJ460438),设计1对特异性引物,建立了绵羊无浆体PCR检测方法,并对其进行特异性、敏感性、重复性试验及临床样品检测。结果显示,该方法能特异性地检测绵羊无浆体,与山羊无浆体、嗜吞噬细胞无浆体、牛无浆体、边缘无浆体、吕氏泰勒虫、绵羊泰勒虫、羊附红细胞体、弓形虫基因组均无交叉反应;该方法检测下限可达到7.7×10-15g·μL-1,比文献报道的PCR敏感10倍(77×10-15g·μL-1);具有良好的重复性;对81份羊临床血液样品检测结果表明,绵羊无浆体感染率为32.1%(26/81),高于文献报道的PCR(MSP4基因)检测结果(18.5%,15/81)。

• 单位
  河南农业大学