艰难梭菌毒素A适配子的筛选和鉴定

作者：刘红菊; 苏恒; 吴爱武^*

来源：检验医学与临床, 2018, 15(24): 3702-3706.

• 艰难梭菌毒素A
• 指数富集配体系统进化
• 适配子
• 亲和常数

目的筛选和鉴定艰难梭菌(Cd)毒素A(TcdA)适配子(Apt)。方法体外合成80bp的单链DNA(ssDNA)随机文库,采用指数富集配体系统进化(SELEX)技术筛选TcdA的核酸适配子。使用DNA MAN5.2.2.0软件和mfold软件对筛选出的适配子序列的同源性和二级结构进行分析,并采用非竞争酶联免疫吸附试验测定其亲和常数。结果经过12轮筛选,文库中随机ssDNA与TcdA的结合率从1.4%增加到44.6%,筛选出来50条适配子,二级结构最稳定的是Apt-A22,其亲和常数为2.25×107 M-1。结论采用SELEX技术成功筛选出高亲和力的TcdA适配子,为临床Cd感染的诊断和治疗提供参考依具。

• 单位
  广州医科大学