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摘要
为了寻找一种准确高效的多片段组装及多点突变方案，将目前常用的多片段组装方法进行了整合与优化，并以果糖-1,6-二磷酸酶1(fructose-1,6-diphosphatase 1, FBP1)基因4位点突变为例进行验证。通过引入突变位点和Bsa I识别序列连接含有突变位点的片段，经过酶切/连接反应后扩增组装成功的目的片段，并引入与线性化载体两端同源的序列，最后进行片段与线性化载体的重组并转化大肠杆菌。经筛选与测序，得到4位点突变重组质粒。该方案弥补了常规的Gibson组装和Golden Gate组装的部分缺点，是一种高效进行多片段组装和多点突变的实验方案。
