基因重组卡介苗高效电转化条件的实验研究

作者：王靖宇; 李丽君; 韩瑞发

来源：山西医药杂志, 2010, (01): 17-19.

• 卡介苗
• DNA
• 重组
• 电转化 BCG vacciner
• DNA
• recombinant
• Electro-transformation

目的探讨卡介苗(BCG)电转化中影响转化效率的因素。方法利用电转化仪将穿梭质粒pYL-hB7-2转入BCG中,考察其影响因素并优化转化条件。转化子利用卡那霉素抗性筛选和聚合酶链反应(PCR)及酶链免疫吸附试验(ELISA)鉴定。结果重组BCG获得较高的转化效率,最高可达8/9。外加电场强度和质粒浓度是决定电转化效率的关键因素,感受态细胞的状态,如生长期和冰浴时间均可影响转化效率。结论成功解决了基因重组BCG构建过程中电转化的问题。

• 单位
  天津市泌尿外科研究所; 山西省肿瘤医院; 山西医科大学第一医院