基于NLRP3炎症小体探讨参苓白术散治疗溃疡性结肠炎的作用机制

作者：刘玉晖; 容子玲; 朱洪杨; 李玉婷; 游宇^*

来源：中国中药杂志, 2022, 47(21): 5863-5871.

DOI：10.19540/j.cnki.cjcmm.20220630.401

• 参苓白术散
• 溃疡性结肠炎
• NLRP3炎症小体
• IL-1β
• MPO

基于NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermoprotein domain 3,NLRP3)炎症小体信号通路探讨参苓白术散(Shenling Baizhu Powder)对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)模型小鼠的作用机制。70只SPF级BALB/c小鼠适应性喂养3 d后，随机分为7组：正常组、模型组、美沙拉嗪组、NLRP3抑制剂MCC950组以及参苓白术散高、中、低剂量组，每组10只。正常组自由饮用双蒸水，其余各组自由饮用葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate, DSS)诱导BALB/c小鼠建立急性UC模型，造模的同时开始灌胃给药，为期1周。实验期间对各组小鼠一般精神状态和疾病活动情况进行记录，并统计评分。实验结束后，收取结肠和血清，使用HE染色法观察结肠组织病理变化，酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测小鼠结肠组织中白细胞介素18(interleukin-18,IL-18)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)和血清中白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)水平的变化情况，免疫荧光法、免疫组化法分别检测结肠组织中NLRP3、IL-18的表达情况，蛋白免疫印迹法检测结肠组织蛋白NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein, ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1(cystein-asparate protease 1,caspase-1)及其相关下游炎症因子的表达水平，以此探讨参苓白术散治疗UC的作用机制。与正常组相比，模型组小鼠疾病活动指数(disease activity index, DAI)评分、结肠病理损伤评分、血清中炎症因子IL-1β、结肠炎症因子IL-18和MPO含量都显著增加(P<0.05,P<0.01);结肠组织出现明显的病理学改变，其炎症因子表达含量升高，结肠中NLRP3、caspase-1、ASC、pro-IL-1β、cleaved-IL-1β、pro-IL-18、cleaved-IL-18蛋白表达显著上调(P<0.01)。与模型组相比，各给药组的DAI评分、病理学损伤评分、血清中炎症因子IL-1β、结肠炎症因子IL-18和MPO的表达均降低，结肠中NLRP3、caspase-1、ASC、pro-IL-1β、cleaved-IL-1β、pro-IL-18、cleaved-IL-18蛋白表达显著下调(P<0.05,P<0.01)。基于前期研究基础结合该实验结果发现，参苓白术散可改善由DSS诱发的UC炎症反应，改善肠道损伤情况，其作用机制可能与调控NLRP3炎症小体信号通路相关蛋白及其相关炎症因子有关。

• 单位
  南昌大学; 江西中医药大学; 第一附属医院消化内科