抗H5N1禽流感病毒VHH抗体库的构建

作者：严安; 孙冰玉; 夏立亮; 吴标; 包文静; 车小燕; 孙志伟; 金维荣; 赵国屏; 熊慧; 王颖

来源：中国免疫学杂志, 2011, (01): 44-49.

DOI：10.3969/j.issn.1000-484X.2011.01.011

• H5N1
• 噬菌体抗体库
• 重链可变区抗体
• 禽流感病毒 H5N1
• Phage display antibody library
• Variable domain of heavy chain antibody
• Avian influenza virus

目的:构建抗H5N1禽流感病毒的小羊驼免疫噬菌体重链可变区抗体库(VHH型抗体库),为抗H5N1的VHH抗体筛选奠定基础。方法:利用H5N1灭活疫苗免疫小羊驼,一定免疫时间后测定小羊驼外周血清中抗体中和活性,分离其外周淋巴细胞,利用RT-PCR方法得到VHH抗体片段。通过优化连接和电转化方法,将足量VHH片段与pCANTAB5E连接后电转入大肠杆菌TG1,获得VHH抗体基因库;检测基因库库容以及多样性,并采用血凝抑制试验对噬菌体抗体库进行初步功能性鉴定。结果:利用H5N1灭活疫苗免疫小羊驼四次后,其外周血清中抗体血清抑制效价可达1∶2 560,构建的VHH抗体基因库库容可达3×108,随机挑选...

• 单位
  上海华冠生物芯片有限公司; 上海交通大学; 军事医学科学院; 上海人类基因组研究中心; 上海市免疫学研究所; 南方医科大学