野生型和突变型人白介素13的大肠杆菌表达及活性分析

作者：刘全华; 华丽; 霍婧; 鲍一笑

来源：现代免疫学, 2010, (03): 207-211.

• 人白介素13
• pET28a( )
• 大肠杆菌
• 活性分析 rhIL-13
• pET28a( )
• E.coli
• activity analysis

利用大肠杆菌表达野生型和突变型重组人白介素13(IL-13),以获得具有生物学活性的重组蛋白。采用PCR方法从质粒pET22b-hIL-13上扩增人成熟IL-13的编码序列。用定点突变引物扩增IL-13突变体(IL-13m)编码基因。将IL-13和IL-13m编码基因分别克隆到原核表达载体pET28a( )中,构建质粒pET28a( )-IL-13和pET28a( )-IL-13m,然后将质粒转化到E.coli BL21(DE3)中,构建重组体,IPTG诱导重组蛋白表达。重组蛋白采用镍柱(Ni-NTA)纯化,纯化后复性,并分析其生物学活性。结果成功得到IL-13和IL-13m重组蛋白,经SDS...

• 单位
  上海交通大学医学院附属新华医院