一株大菱鲆源杀鲑气单胞菌非典型株的分离鉴定及毒力基因型

作者：王鹤; 王文豪; 黄华; 刘晓丹; 张丽文; 杨涛; 胡乐彬; 李战军^*

来源：大连海洋大学学报, 2022, 37(04): 558-567.

DOI：10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-254

• 大菱鲆
• 杀鲑气单胞菌非典型株
• 杀日本鲑亚种
• 分离鉴定
• 毒力基因

为研究大菱鲆Scophthalmus maximus杀鲑气单胞菌非典型株的特性，利用常规病原菌分离方法，从某养殖场患病个体脾脏分离纯化获得一株优势菌BHAS-1,通过生理生化鉴定、序列比对、回归感染、毒力基因检测和药敏试验等对其开展研究。结果表明：分离株BHAS-1为无运动能力、β溶血的革兰氏阴性杆菌，与杀鲑气单胞菌非典型株具有相似的生理生化特性，但该分离株不产生吲哚，不能利用甘露糖；对菌株开展16S rRNA、gyrB、vapA基因扩增和序列比对，基于vapA基因构建的系统进化关系中，分离株BHAS-1与Aeromonas salmonicida subsp.masoucida RZ6S-1及ATCC 27013T单独聚为一支，结合生理生化鉴定结果，判定分离株为杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种A.salmonicida subsp.masoucida;菌株BHAS-1对大菱鲆的半致死浓度(LD50)为1.62×108 CFU/mL,毒力基因型为aer+-zot+-dna+-ser+-lip+-sp+-alt+-act+-ast+-epa+-fla+-ahyB+;菌株BHAS-1对恩诺沙星、四环素等7类13种抗生素敏感，对复方新诺明、氯霉素等6类7种抗生素耐药，耐药率为31.82%。研究表明，应用vapA基因可以有效鉴别杀鲑气单胞菌不同亚种。