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摘要
目的 探讨安寐丹对斑马鱼睡眠剥夺模型昼夜节律及能量代谢的影响及作用机制。方法 75尾4月龄野生型AB系斑马鱼随机分为空白组、模型组、褪黑素组(0.464 mg·L-1)、安寐丹低剂量组(0.129 g·L-1)、安寐丹高剂量组(0.514 g·L-1)，采用咖啡因(25 mg·L-1)诱导4天建立成年斑马鱼睡眠剥夺模型。以行为追踪系统监测24 h昼夜节律，T型迷宫检测斑马鱼学习记忆能力，尼氏染色法观察神经细胞损害程度，实时荧光定量PCR检测脑组织clocka、bmal1、cry1a、per1a、per2的mRNA表达水平，定磷法检测肝脏Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶及总ATP酶活力。结果 与空白组相比，模型组静止状态总计数、持续时长、覆盖距离减少，大运动状态总计数、持续时长、覆盖距离增加，24 h昼夜节律变化幅度特征降低；第1次进入EC区的时间增加(P<0.05)，在EC区累计停留时间减少；中脑神经元尼氏小体减少，着色变浅；bmal1、cry1a mRNA表达水平升高(P<0.01);Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶及总ATP酶活性降低。与模型组相比，安寐丹增加静止状态计数(P<0.05)、减少大运动状态计数(P<0.05)，恢复昼夜节律特征；缩短第1次进入EC区的时间，增加EC区的停留时间；保护神经元胞体结构，增加尼氏小体数目；降低bmal1、cry1a mRNA相对表达量(P<0.01)；升高Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶及总ATP酶活力(P<0.05,P<0.01)，并呈现出剂量相关性。结论 安寐丹可以改善斑马鱼睡眠剥夺模型昼夜节律，其机制可能与干预bmal1、cry1a等生物钟基因，提高Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶以及总ATP酶等能量代谢酶活性相关。
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