防御素HNP-3成熟肽酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活和毒性检测

作者：马生秀; 邓璐霞; 罗林; 彭媛媛; 路会侠; 张敏; 熊文碧; 冯云; 吴琦; 王伯瑶; 黄宁

来源：航天医学与医学工程, 2007, (02): 151-153.

DOI：10.16289/j.cnki.1002-0837.2007.02.015

• 防御素
• HNP-3
• 成熟肽
• 酵母双杂交 human heutrophil defensins
• HNP-3
• mature peptides
• yeast two-hybrid

目的用含防御素HNP-3成熟肽cDNA片段构建酵母双杂交诱饵质粒,进行自激活和毒性检测。方法培养HL-60细胞,提取RNA,RT-PCR扩增含防御素HNP-3成熟肽的cDNA片段,克隆入pBlue-script-SK-II质粒,经测序鉴定后,再亚克隆到人酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,PCR及测序鉴定。重组诱饵质粒用缺陷培养基筛选方法进行自激活和毒性检测。结果构建的重组质粒pBluescript-SK-II-HNP-3,经测序鉴定,插入片段为HNP-3成熟肽的cDNA序列。亚克隆构建的重组诱饵质pGBKT7-HNP-3,测序鉴定表明其插入目的基因序列无误。重组诱饵质粒自激活和毒性检测显示无自...

• 单位
  四川大学华西医院; 四川大学