摘要
牛奶中的脂肪酸含量及成分决定着牛奶的品质,而miRNA能够调控哺乳动物乳腺中脂质代谢途径,进而影响脂质含量及其成分。本研究旨在通过miRNA转染技术揭示miR-206对牛(Bos taurus)乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells, BMECs)中脂质合成相关基因表达、甘油三酯含量及脂肪酸组成的影响。在牛乳腺上皮细胞中转染60 nmol/L miR-206模拟物和抑制物,应用qRT-PCR技术和生化方法分别检测脂质合成相关基因的表达和细胞内甘油三酯含量,使用气相色谱检测脂肪酸组成的变化。结果表明,miR-206模拟物抑制甘油三酯合成相关基因线粒体甘油-3-磷酸酰基转移酶(glycerol-3-phosphate acyltransferase mitochondrial, GPAM)、磷酸甘油酰基转移酶6 (1-acylglycerol-3-phosphate O-acyltransferase6, AGPAT6)、二酰甘油酰基转移酶1 (diacylglycerol O-acyltransferase 1, DGAT1)、脂素1 (lipin 1, LPIN1)的表达(P<0.01),细胞内甘油三酯含量显著减少(P<0.05);固醇调节元件结合蛋白1 (sterol-regulatory element binding proteins 1, SREBP1)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase, FASN)、乙酰辅酶A羧化酶α(acetyl-CoA carboxylaseα, ACACA)和长链脂肪酸延长酶6 (long chain fatty acid elongase 6, ELOVL6)的表达量也有所下调,脂肪酸成分发生改变,其中C14∶0 (P<0.01)和C22∶6n3 (P<0.05)含量显著降低,C16∶1含量显著增加(P<0.01)。miR-206抑制物则促进GPAM、AGPAT6、DGAT1和LPIN1表达(P<0.01),细胞内甘油三酯含量增加,SREBP1、FASN、ACACA和ELOVL6表达量显著上调(P<0.01),但脂肪酸成分未发生改变。综上所述,miR-206对牛乳腺上皮细胞脂质合成相关基因的表达具有负调控作用,导致细胞内甘油三酯含量减少以及脂肪酸组成改变,提示miR-206在牛乳腺脂代谢中可能具有重要作用,本研究为深入探讨miR-206调控牛乳腺上皮细胞脂质代谢的分子机理提供基础资料。
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单位天津市畜牧兽医研究所; 山西大同大学; 河北农业大学; 生命科学学院; 动物科技学院