玉米内生菌YY1菌株抗菌蛋白的稳定性和活性组分分析

作者:钱欣雨; 王会敏; 候美玲; 申珅; 郝志敏*; 董金皋*
来源:植物保护学报, 2023, 50(03): 725-732.
DOI:10.13802/j.cnki.zwbhxb.2023.2021147

摘要

为探究枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis菌株YY1抗菌蛋白的基本特性,采用硫酸铵分级沉淀法对蛋白粗提液进行提取,测定温度、酸碱性、蛋白酶和金属离子对抗菌蛋白稳定性的影响,利用阴离子交换柱层析和葡聚糖凝胶柱层析对其组分进行分离,通过MALDI-TOF质谱对其活性组分进行初步鉴定。结果表明,当硫酸铵饱和度为50%时,菌株YY1产生的粗蛋白对玉米大斑病菌Setosphaeria turcica的抑制效果最好,抑菌圈半径达2.20 cm。该粗蛋白具有较高的热稳定性,90℃处理120 min其抑菌活性未受到明显影响,121℃处理120 min其抑菌活性仍可保持原有活性的85.0%。该粗蛋白具有较好的耐碱性,pH 5~11条件下其抑菌活性稳定,pH 3~4条件下其抑菌活性显著下降。该粗蛋白对蛋白酶K和胰蛋白酶不敏感,两者处理后的抑菌活性分别为对照的97.5%和98.9%;不同浓度金属离子对其抑菌活性的影响存在差异,Cr3+可使该粗蛋白完全失活,Zn2+、Li+、K+、Na+、Mg2+和Fe2+对其抑菌活性有促进作用。该抗菌蛋白的分子量约为30 kD,命名为YY1-AFP6,将其初步鉴定为烯酰辅酶A水合酶同源蛋白。

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