大鼠Smad7基因真核表达质粒的构建与鉴定

作者：杨小艳; 郑勇; 李睿; 徐丽红; 周婷; 杨军

来源：天津医药, 2008, (11): 891-893.

• 质粒
• DNA结合蛋白质类
• 肝硬化
• 克隆
• 生物
• 大鼠 plasmid DNA-binding proteins liver cirrhosis cloning
• organism rats

目的:构建并鉴定大鼠Smad7/pcDNA3.1( )真核表达质粒,为进一步研究Smad7的抗肝纤维化作用提供实验基础。方法:TRIzol法抽提大鼠肝组织总RNA,琼脂糖凝胶电泳检测其完整性,紫外分光核酸蛋白分析仪测定其浓度与纯度,两步法获取大鼠Smad7cDNA片段,CaCl2法制备感受态细胞,应用EcoRI及XhoI在pcDNA3.1( )多克隆位点处进行双酶切,切胶回收载体及目的片段酶切产物,将回收的线性化pcDNA3.1( )与Smad7cDNA连接,构建Smad7/pcDNA3.1( )重组质粒,转化DH5α大肠杆菌,测序鉴定双酶切证实的阳性克隆。结果:电泳检测RNA的完整性良好,2...

• 单位
  石河子大学医学院第一附属医院