用强直性脊柱炎患者血清筛选噬菌体随机肽库

作者：王敏; 李先平; 周勇; 曹虹; 何斌; 郑荣; 姚冬梅

来源：中国免疫学杂志, 2009, 25(09): 844-847.

• 噬菌体随机肽库
• 强直性脊柱炎
• 血清标志物

目的:用纯化的强直性脊柱炎患者血清IgG从噬菌体随机12肽库中免疫筛选出能与强直性脊柱炎患者血清特异性结合的抗原模拟肽。方法:首先用正常人纯化血清免疫球蛋白IgG作为固相配基吸附非特异性噬菌体,然后以纯化强直性脊柱炎患者血清免疫球蛋白IgG包被,按吸附-洗脱-扩增的淘洗过程对上述处理过的噬菌体液进行3轮筛选,随机挑取噬菌体克隆用ELISA检测其特异性,并对部分克隆进行测序。用ELISA方法初步观察阳性克隆的诊断价值。结果:3轮筛选的投入产出比逐轮升高,提示具有良好的富集效果。对从第3轮洗脱物中挑选出的20个克隆进行结合试验,发现17个克隆与强直性脊柱炎患者纯化血清IgG特异性结合。其中7个克隆测序表明,7个克隆源于同一克隆,其外源插入肽为LALPPLAPN-HHH。该阳性克隆对50例强直性脊柱炎患者血清的检出率为92.0%,但该克隆对正常人血清亦有14.0%的阳性率。结论:用纯化的强直性脊柱炎患者血清IgG从噬菌体随机12肽库中筛选到具有一定生物学功能的抗原模拟肽。

• 单位
  中南大学湘雅医学院; 中南大学湘雅二医院