大鼠肝脏前体细胞通过直接共培养抑制肝星状细胞的活化

作者：孙亚朦; 杨爱婷; 王萍; 丛敏; 刘天会; 赵文姗; 贾继东; 尤红

来源：肝脏, 2013, 18(12): 815-819.

DOI：10.14000/j.cnki.issn.1008-1704.2013.12.011

• 直接共培养
• 细胞活化
• 细胞外基质
• 肝星状细胞
• 肝前体细胞

目的观察大鼠肝脏前体细胞系(WB-F344)对肝星状细胞系(HSC-T6)活化及细胞外基质的影响。方法将慢病毒-GFP空白载体转染的HSC-T6与WB-F344按1∶1与1∶2比例直接共培养3 d,使用流式细胞仪对其进行分选,慢病毒-GFP空白载体转染的HSC-T6单独培养作为对照,观察HSC-T6活化指标及细胞外基质相关指标表达的变化。结果经流式细胞仪检验慢病毒-GFP空白载体转染HSC-T6的效率可达近90%;与WB-F344直接共培养3 d后,HSC-T6的细胞形态与对照组相比无差别;同时利用GFP对各组HSC-T6细胞分选后,经流式细胞仪检验纯度可达94%;对分选后的细胞进行分析发现,直接共培养组HSC-T6细胞活化标记物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在基因水平(1∶1与1∶2组分别是对照组的0.66与0.61倍,P<0.05)和蛋白水平(1∶1与1∶2组分别是对照组的0.61倍与0.25倍,P<0.05)的表达均下降;HSC-T6细胞的细胞外基质标记物I型胶原(Col-I)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的表达与对照组比较差异无统计学意义。结论 WB-F344细胞可以抑制HSC-T6细胞的活化,但在一定时间内对其细胞外基质的表达没有影响。

• 单位
  首都医科大学附属北京友谊医院