脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化衍生物免疫亲和柱的研制

作者：董曼佳; 杨婷婷; 陆廷瑾; 石文婷; 陆丽婷; 张海涛; 张一平

来源：粮食与食品工业, 2018, 25(02): 73-79.

• 脱氧雪腐镰刀菌烯醇
• 衍生物
• 免疫亲和柱
• 定向偶联
• 性能评价

本实验采用抗DON杂交瘤细胞株SW-3 F4、SW-3 G12,分别制备出两种不同特性的单抗,然后与蛋白A-琼脂糖凝胶定向偶联,制备出了能同时分离净化DON、3-Ac-DON和15-Ac-DON的脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)及其乙酰化衍生物的三合一免疫亲和柱(IAC),并对其性能进行了评价。结果表明:抗体1和抗体2均为IgG1亚型,亲和常数分别为3.0×108 L/mol和2.0×109 L/mol,与DON、3-Ac-DON和15-Ac-DON的交叉反应率分别为100%、0.1%、453%和100%、101%、6%。制备的IAC柱,单标过柱的平均柱容量DON、3-Ac-DON和15-Ac-DON依次为3 243 ng/0.25 mL、1 285 ng/0.25 mL和1 527 ng/0.25 mL,非特异性吸附率小于2.3%,3种毒素在小麦基质中平均加标回收率均大于89%。本实验制备的IAC柱容量大、回收率高,适于DON及其乙酰化衍生物的纯化分离。

• 单位
  江苏省苏微微生物研究有限公司