海鲜产品副溶血弧菌增菌培养前后tdh-/tdh+菌株比例差异分析

作者：鞠长燕; 马艳萍; 刘敏; 段永翔; 逄波; 张茂俊^*

来源：中国病原生物学杂志, 2020, 15(04): 402-405.

DOI：10.13350/j.cjpb.200407

• 副溶血弧菌
• 耐热直接溶血素
• 荧光定量PCR
• 生长曲线

目的分析海鲜产品中副溶血弧菌tdh-/tdh+株在增菌培养前后的比例差异,探讨副溶血弧菌相关食源性疾病中tdh+菌株在食品中难以检测到的原因。方法采集市场零售的50份海鲜样品,根据GB 4789.7-2013进行副溶血弧菌的增菌培养。采用双重荧光定量PCR,利用标准曲线确定tdh-和tdh+菌株的分布比例。采用模拟试验,将6组tdh-/tdh+株配对,在总菌量为103、104、105、106cfu/mL条件下混合增菌培养,测定增菌前后tdh-/tdh+株的比例。绘制上述12株副溶血弧菌的单菌生长曲线,进一步比对tdh-和tdh+株的生长速度。结果荧光PCR显示,50份海鲜产品中副溶血弧菌的污染范围为2.1×104～5.1×106cfu/g,增菌前tdh-/tdh+株的比例范围为2.2×102∶1～1.9×105∶1,增菌后tdh-/tdh+株的比例范围为7.1×102∶1～3.3×105∶1。混合生长试验显示,tdh-/tdh+株初始比例范围为1.8∶1～85∶1,增菌后tdh-/tdh+株比例范围变为0.1∶1～11∶1。总体上,初始菌量接近的情况下进行混合培养,tdh+株的生长速度并不比tdh-株低。单菌生长曲线显示,tdh-株与tdh+株在相同条件下生长速度无明显差异。结论与tdh-株相比,海鲜产品中tdh+株所占比例低,增菌后所占比例更低,导致tdh+株在海鲜产品样本增菌后难以被检出,而非tdh+株本身的生长速度低于tdh-株造成。

• 单位
  深圳市南山区疾病预防控制中心; 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所