摘要
目的:研究下调lncRNA LINC00176对肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药和自噬的影响及机制。方法:qRT-PCR方法测定正常支气管上皮16HBE细胞和肺癌A549、A549/DDP、NCI-H1299、SK-MES-1细胞中LINC00176的表达。将A549/DDP细胞分成对照组、si-NC组、si-LINC00176组、si-LINC00176+Anti-miR-NC组、si-LINC00176+Anti-miR-138-5p组。MTT实验检测顺铂对A549/DDP的半数抑制浓度(IC50)。流式细胞术测定细胞凋亡。Western blot测定LC3-I、LC3-II、Beclin 1、C-Caspase-3蛋白表达。利用荧光素酶报告系统鉴定LINC00176和miR-138-5p的靶向关系。结果:与16HBE细胞比较,A549、A549/DDP、NCI-H1299、SK-MES-1细胞中LINC00176表达水平显著升高(P<0.01)。与A549细胞比较,A549/DDP细胞中LINC00176表达水平显著升高(P<0.01)。与对照组、si-NC组比较,si-LINC00176组A549/DDP细胞IC50显著降低(P<0.01),LC3-II/LC3-I、Beclin 1蛋白表达显著降低(P<0.01),凋亡率、C-Caspase-3蛋白表达、miR-138-5p表达水平显著升高(P<0.01)。LINC00176与miR-138-5p直接结合。与si-LINC00176+Anti-miR-NC组比较,si-LINC00176+Anti-miR-138-5p组A549/DDP细胞IC50显著升高(P<0.01),LC3-II/LC3-I、Beclin 1蛋白表达显著升高(P<0.01),凋亡率、C-Caspase-3蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:下调lncRNA LINC00176通过靶向上调miR-138-5p能够抑制肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药,抑制细胞自噬,诱导细胞凋亡。
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单位神经内科; 宁夏医科大学总医院; 银川市第二人民医院