极小种群野生植物十万大山苏铁SSR和ISSR反应体系建立及引物筛选

作者：秦惠珍; 杨秀德; 唐健民; 邹蓉; 朱成豪; 韦霄; 蒋运生; 熊忠臣; 唐凤鸾

来源：分子植物育种, 2021, 1-24.

• 十万大山苏铁
• 反应体系
• ISSR-PCR
• SSR-PCR
• 引物筛选

为筛出适用于极小种群野生植物十万大山苏铁的SSR引物和ISSR引物，建立十万大山苏铁的SSR-PCR和ISSR-PCR反应体系，本研究以十万大山苏铁为试验材料，用改良CTAB法提取其基因组DNA，采用L16(43)正交设计方法，探索2×Taq Mix、引物浓度和模板DNA含量3个指标参数对十万大山苏铁SSR-PCR和ISSR-PCR反应体系的影响。建立了相关优化体系：20 μL的SSR-PCR扩增体系中2×Taq Mix 10 μL、引物0.4 μmol/L、模板DNA 25 ng；20 μL的ISSR-PCR扩增体系中含2×Taq Mix 10 μL、引物0.5 μmol/L、模板DNA 60 ng。结果表明，建立的反应体系及筛选出来的15对SSR引物和9条ISSR引物通过了21份十万大山苏铁样品验证，反应体系稳定可靠。

• 单位
  广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所