人源性长寿保障基因2对脂多糖诱导的PC12细胞损伤的影响

作者：赵红领^*; 李磊; 杨慧; 苗成

来源：中国临床药理学杂志, 2020, 36(02): 181-184.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2020.02.022

• PC12细胞
• 脂多糖诱导
• 人源性长寿保障基因2基因
• 核转录因子kappaB信号通路
• 凋亡
• 活性氧

目的探讨沉默人源性长寿保障基因2(LASS2)基因对脂多糖(LPS)诱导的PC12细胞活力、凋亡及核转录因子kappaB(NF-κB)信号通路的影响。方法将大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞分为4组:空白组(无任何处理)、LPS组(200μg·mL-1 LPS处理PC12细胞)、LPS+NC组(转染阴性对照siRNA质粒后用200μg·mL-1LPS处理)、LPS+si-LASS2组(转染LASS2的特异性siRNA质粒后用200μg·mL-1LPS处理)。以蛋白质印迹法检测LASS2、磷酸化NF-κB(p-NF-κB)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)和环氧化酶-2(COX-2)蛋白表达。细胞检测试剂盒-8和流式细胞术分别检测细胞活力(OD值)与凋亡率。活性氧(ROS)试剂盒检测ROS含量(相对荧光强度)。结果空白组、LPS组、LPS+NC组、LPS+si-LASS2组的LASS2蛋白相对表达量分别为0.11±0.01,0.80±0.07,0.79±0.06和0.16±0.02;这4组的细胞活力分别为0.81±0.06,0.40±0.04,0.41±0.04和0.68±0.06;这4组的细胞凋亡率分别为(4.51±0.46)%,(31.33±1.75)%,(30.06±1.61)%和(16.74±1.01)%;这4组的ROS水平分别为248.20±15.30,521.80±23.60,518.90±22.30,396.60±18.70;这4组的COX-2蛋白相对表达量分别为0.07±0.01,0.66±0.06,0.67±0.06和0.17±0.02;这4组的p-NF-κB蛋白相对表达量分别为0.10±0.01,0.51±0.05,0.53±0.05和0.18±0.02;这4组的Cleaved-caspase3蛋白相对表达量分别为0.02±0.01,0.29±0.03,0.28±0.03和0.06±0.01。上述指标:LPS组和LPS+NC组与空白组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);LPS+si-LASS2组与LPS组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论沉默LASS2表达可增强PC12细胞活力,抑制细胞凋亡,从而对神经损伤有保护作用,其机制可能与抑制Cleaved-caspase3、p-NF-κB、COX-2表达和ROS水平有关。

• 单位
  新乡市中心医院; 神经内科