siRNA对人脐静脉内皮细胞中人剪切修复基因表达和凋亡的影响

作者：俞菊梅; 孙国芳; 李菊香; 洪葵; 程晓曙

来源：广东医学, 2014, 35(18): 2817-2820.

DOI：10.13820/j.cnki.gdyx.2014.18.003

• 干扰序列
• 人剪切修复基因XPD
• 人脐静脉内皮细胞
• 转染

目的向人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中导入靶向人剪切修复基因D干扰序列(XPD-siRNA),观察其对HUVEC的XPD基因表达和凋亡的影响。方法以XPD为靶基因,构建3个特异性siRNA重组质粒,经转染后观察其对HUVEC中XPD的沉默作用;并转染沉默效率最佳的siRNA,观察其对细胞凋亡的影响。结果Western blot和RT-PCR结果显示,与阴性对照组相比,3个重组质粒XPD-siRNA的转染均能降低HUVEC中XPD的表达(P<0.01),其中XPD-siRNA-2的沉默效率最高(P<0.01)。流式细胞仪结果显示,与阴性对照组相比,XPD-siRNA-2组能降低HUVEC凋亡率(P<0.01)。Western blot结果显示,与阴性对照组相比,转染XPDsiRNA-2能下调Bax(P<0.01)和上调Bcl-2(P<0.01)的表达。结论 XPD-siRNA转染能有效沉默HUVEC中XPD基因的表达。所筛选沉默效率最佳的XPD-siRNA能抑制HUVEC凋亡,而Bax和Bcl-2可能参与了此过程。

• 单位
  南昌大学第二附属医院