过表达NDRG1对绵羊原代子宫内膜上皮细胞生物功能的影响

作者：龙德智; 郝科兴; 陈慧慧; 胡广东^*; 王静^*

来源：农业生物技术学报, 2023, 31(11): 2304-2312.

• N-myc下游调节基因1 (NDRG1)
• 原代子宫内膜上皮细胞
• 绵羊

子宫内膜上皮细胞作为子宫内重要的细胞之一，其生物功能的改变影响着雌性动物妊娠的发生。为了探究N-myc下游调节基因1 (N-myc downstream regulated gene 1, NDRG1)的过表达对绵羊(Ovis aries)原代子宫内膜上皮细胞的生物功能的影响，本研究纯化原代绵羊子宫内膜上皮细胞，用瞬时转染的方法将NDRG1过表达载体导入原代子宫内膜上皮细胞，qRT-PCR和Western blot检测瞬时细胞模型的构建；用qRT-PCR检测细胞周期蛋白D1基因(cyclin D1, CCND1)、CCNB1和CCNA1、上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)相关基因的表达；CCK-8法检测细胞的增殖能力，划痕实验检测细胞迁移能力。结果表明，pcDNA3.1-NDRG1组NDRG1基因及其蛋白的表达量极显著增高(P<0.01);CCND1表达量极显著下降(P<0.01);E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达量极显著增高(P<0.01)，波形蛋白基因(Vimentin)表达量极显著降低(P<0.01);CCK-8结果显示，pcDNA3.1-NDRG1组增殖能力被抑制；划痕实验结果显示，pcDNA3.1-NDRG1组抑制细胞迁移能力。综上表明，NDRG1的过表达抑制了细胞的增殖，阻断了细胞周期G1/S的转变，抑制了其迁移能力，提示这与EMT过程相关。本研究为促进绵羊早期妊娠成功提供研究材料。

• 单位
  石河子大学; 动物科技学院