罗非鱼hepcidin 1-5成熟肽在毕赤酵母中的表达和活性研究

作者：梁盈; 梁瑞; 张永安; 祁克宗; 涂健; 彭开松

来源：动物医学进展, 2014, 35(07): 38-43.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2014.07.029

• 罗非鱼hepcidin
• 酵母表达
• 斑点-酶联免疫吸附试验
• 抑菌活性
• 淋巴细胞增殖

为获得重组酵母分泌表达的莫桑比克罗非鱼hepcidin并进行其功能研究,将罗非鱼hepcidin 1-5(TH1-5)成熟肽cDNA插入表达载体pPIC9K,获得重组分泌表达质粒pPIC9K-TH1-5,电转化毕赤酵母GS115,阳性克隆经甲醇诱导获得表达上清;表达上清冻干品经Dot-ELISA检测,并分析了表达产物对指示菌和鸡外周血淋巴细胞的影响。结果表明,TH1-5成熟肽可通过表达质粒pPIC9K在毕赤酵母中实现分泌型表达,Dot-ELISA检测表达上清中含有TH1-5。重组表达的TH1-5对大肠埃希菌(CMCC44102)、金黄色葡萄球菌(ATCC25923)、铜绿假单胞菌(ATCC27853)、粪肠球菌(ATCC29212)具有明显的抑菌活性;含重组表达TH1-5的上清冻干品(6.25mg/mL)可协同ConA(0.125μg/mL)或LPS(0.125μg/mL)促进鸡外周血淋巴细胞的增殖。

• 单位
  安徽农业大学; 动物科技学院; 中国科学院水生生物研究所; 淡水生态与生物技术国家重点实验室