牛病毒性腹泻病毒Nano-PCR检测方法的建立及初步应用

作者：李健友; 刘泽余; 刘占悝; 李家伟; 张淑琴; 王超; 郭利

来源：中国兽医科学, 2018, 48(05): 580-585.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2018.0110

• 牛病毒性腹泻病毒
• Nano-PCR
• RT-PCR
• IDEXX试剂盒

为建立一种特异、灵敏、快速检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的分子检测方法,本研究利用金纳米颗粒材料与传统PCR技术相结合,针对BVDV 5′UTR保守序列设计引物,建立了BVDV Nano-PCR新型分子检测方法,并与RT-PCR及商品化IDEXX试剂盒BVDV抗原检测方法分别对临床样品进行对比研究。特异性与敏感性试验结果显示,建立的Nano-PCR只对BVDV特异,而对牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)、牛副流感3型病毒(BPIV3)均无交叉反应;Nano-PCR敏感性是普通PCR的10倍,最低核酸检测量为6.84×102copies/L。临床检测结果显示,建立的Nano-PCR方法对38份临床样品的阳性检出率为34.21%,是RT-PCR的2.6倍,是IDEXX试剂盒的1.5倍。本研究结果表明,建立的BVDV Nano-PCR方法可以用来对临床样品进行快速诊断和鉴定,具有特异性高、灵敏度好、快速稳定的优点。

• 单位
  农业部; 东北农业大学; 中国农业科学院特产研究所