丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5B反式激活基因的克隆化研究

作者：刘妍; 白桂芹; 成军; 王志凌; 张黎颖; 纪冬

来源：军医进修学院学报, 2005, (06): 413-415.

• C型肝炎样病毒属
• 病毒非结构蛋白质类
• 反式激活(遗传学) hepatitis C-like virus
• viral nonstructural prote ins
• transactivation(genetics)

目的:应用抑制性消减杂交(suppression subtractive hybrid ization,SSH)技术构建丙型肝炎病毒非结构蛋白5B(HCV NS5B)转染细胞差异表达cDNA消减文库,克隆HCV NS5B蛋白反式激活相关基因。方法:以HCVNS5B表达质粒pcDNA3.1(-)-NS5B转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为对照,制备转染后的细胞裂解液,提取mRNA并逆转录为cDNA,进行抑制性消减杂交(SSH)分析。随机挑取克隆进行测序及同源性分析。结果:文库扩增后得到35个阳性克隆,经菌落PCR分析显示其中26个克隆含有大小不等的200~1000 bp插入片段...

• 单位
  解放军第302医院