基于重组毕赤酵母的2-癸烯酸生物合成研究

作者:张丽华; 张子洋; 王子睿; 姜彦君; 苏静; 李丕武; 范翰; 王瑞明; 汪俊卿*
来源:齐鲁工业大学学报, 2021, 35(03): 1-6.
DOI:10.16442/j.cnki.qlgydxxb.2021.03.001

摘要

2-癸烯酸是一种具有2位不饱和键的中链脂肪酸,是合成功能化合物10-羟基-2-癸烯酸的重要前体物质。本研究首先将硫脂酶基因YdiI和脂肪酸CoA脱氢酶基因FadA分别连接至具有pGAP启动子的pGAPZαA载体上,并电转化至毕赤酵母GS115感受态中,经过Zeocin抗性筛选及基因组PCR鉴定后,成功获得重组载体同源重组至毕赤酵母GS115基因组上的阳性重组子。采用气相色谱-质谱联用方法对发酵产物进行检测,结果发现培养12 h后发酵产物中有2-癸烯酸出现,在发酵24 h产量可达33.7 mg/L,这表明YdiI和FadA基因已成功转入毕赤酵母GS115中。本研究成功构建了能够合成2-癸烯酸的重组毕赤酵母GS115工程菌,为下一步利用毕赤酵母进一步合成10-羟基-2-癸烯酸打下基础。

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