抗血小板整合素β3抗体诱导内皮细胞凋亡机制的研究

作者：王健玉; 王明镜; 孙平; 孙妍; 王学哲; 胡晓梅; 全日城^*; LIANG Simon-Xun

来源：中国实验血液学杂志, 2021, 29(02): 567-573.

DOI：10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2021.02.041

• 免疫性血小板减少症
• 抗整合素β3抗体
• Akt
• 凋亡
• 内皮细胞

目的:探讨抗血小板整合素β3抗体对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)的损伤及其相关机制。方法:收集36例慢性免疫性血小板减少症患者的血清,通过流式细胞术和单克隆抗体特异性俘获血小板抗原技术(MAIPA)筛选出含抗整合素β3抗体的患者血清。用抗整合素β3血清处理HUVEC后,乳酸脱氢酶(LDH)活性测定法检测HUVEC损伤情况,流式细胞术检测HUVEC凋亡情况,逆转录实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测HUVEC凋亡相关基因Bax表达情况,Western blot检测细胞凋亡相关信号通路蛋白Akt和相关蛋白Bax的表达情况。用抗整合素β3血清结合Akt激活剂SC79处理HUVEC后,LDH活性测定法检测HUVEC损伤情况,流式细胞术检测HUVEC的凋亡情况,RT-q PCR检测HUVEC凋亡相关基因Bax的表达情况。结果:从36份患者血清中筛选出5份含抗整合素β3抗体血清,用这些血清处理HUVEC后,细胞外LDH活性增加(P <0.05),细胞凋亡比例增加(P <0.05),Bax蛋白和mRNA表达水平上调(P <0.05),p Akt蛋白表达下调(P <0.05)。抗整合素β3血清结合SC79处理HUVEC后,与单独使用抗整合素β3血清处理组相比,细胞外LDH活性显著降低(P <0.05),HUVEC凋亡比例显著下降(P <0.05),Bax基因表达下降(P <0.05)。结论:抗整合素β3抗体在体外能够引起HUVEC的损伤和凋亡,其作用机制可能与抑制Akt信号通路有关,且Akt激活剂SC79能够在体外抑制抗整合素β3抗体引起的HUVEC损伤和凋亡。

• 单位
  锦州医科大学; 中国中医科学院西苑医院; 济宁市第一人民医院; 基础医学院