抑制性消减杂交技术筛选XTP4蛋白反式调节基因

作者：韩萍刘妍成军李莉朱传琳吴勤

来源：解放军医学杂志, 2004, (10): 887-888.

• 肝炎病毒
• 乙型
• X蛋白
• 反式激活
• 抑制性消减杂交 hepatitis B virus
• X protein
• transactivation
• suppression subtractive hybridization

目的　筛选、克隆乙型肝炎病毒 (HBV)X蛋白 (HBxAg)反式激活基因XTP4转染肝癌细胞后的反式调节基因 ,探索XTP4基因表达对肝细胞基因表达谱的影响。方法　常规的分子生物学技术构建真核表达载体pcDNA3 1( ) XTP4 ,应用抑制性消减杂交(SSH)技术对重组表达质粒pcDNA3 1( ) XTP4转染的HepG2细胞和空载体转染的相同细胞差异表达的mRNA进行研究 ,将富集的二次PCR产物与T/A载体连接 ,并转化大肠杆菌进行文库扩增 ,随机挑取克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析。结果　消减文库扩增后得到 2 1个阳性克隆 ,PCR分析显示其中 16个克隆含有 2 0 ...

• 单位
  解放军第302医院