脱细胞基质与脂肪干细胞构建兔耳软骨的研究

作者：王璐; 任曼曼; 简玉洛; 孟宝玺; 马富廉; 王皖军^*; 郭淑英

来源：中华耳鼻咽喉头颈外科杂志, 2019, 54(02): 133-138.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1673-0860.2019.02.007

• 组织工程
• 耳软骨
• 干细胞
• 脂肪组织

目的观察脂肪干细胞(adipose tissue-derived stem cells)与软骨脱细胞基质构建兔耳软骨的效果。方法从32例抽脂减肥患者的脂肪组织中提取脂肪干细胞体外传代培养。通过脱细胞方法用猪耳软骨制备天然生物支架材料, 再用二代ADSC以5.0×107个/ml的细胞浓度接种于预成型的天然生物材料支架上, 体外培养3 d, 形成细胞支架复合物。采用随机数字表法将32只新西兰大白兔分为对照组A、对照组B、对照组C和实验组, 每组8只, 均行耳软骨缺损建模。实验组、对照组A、对照组B分别将细胞支架复合物、脂肪干细胞、软骨脱细胞基质支架移植于耳软骨缺损处, 对照组C则直接逐层缝合耳前组织和皮肤。术后16周后兔耳廓软骨取材, 观察修复效果。新生软骨标本行甲苯胺蓝染色、HE染色、Ⅱ型胶原免疫组化及番红O染色观察, 并行Ⅱ型胶原阳性染色结果定量分析以及耳软骨组织弹性检测。应用SPSS17.0软件进行统计学分析。结果大体观察见对照组(A、B、C)软骨缺损处由肉芽样组织充填, 而实验组软骨缺损修复良好。实验组与对照组软骨缺损修复区组织湿重比较, 差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色显示, 3个对照组仅有纤维组织充填耳软骨缺损处, 实验组耳软骨缺损处可见软骨陷窝形成。3个对照组修复区甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组化及番红O染色均为阴性, 而实验组为阳性。耳软骨弹性常数检测, 实验组新生软骨与正常耳软骨比较, 差异无统计学意义(P>0.05)。结论脂肪干细胞与软骨脱细胞基质结合构建的兔耳新生软骨的力学和组织学已接近正常耳软骨。软骨脱细胞基质材料复合脂肪干细胞, 对耳软骨缺损具有较好的修复重建能力, 具有潜在的临床应用价值。

• 单位
  郑州大学第二附属医院