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摘要
目的观察由黄连黄芪等中药组成的中药复方制剂对2型糖尿病视网膜病变(DR)小鼠的血管保护作用。方法雄性C57BL/6小鼠预留20只作为空白组,普通饲料喂养,其余动物以高糖高脂饲料(kk饲料)喂养加ip给予链脲佐菌素(100 mg·kg-1)建立2型糖尿病小鼠模型,每天分别ig给予羟苯磺酸钙0.3 g·kg-1或中药复方0.36、0.72和1.43 g·kg-1,连续给药10周。测量小鼠给药后血糖,检测糖耐量(AUC)、胰岛素C肽、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-18、NF-κB、血栓素B2(TXB2)和6酮前列腺素F1α(6-keto-PGF1α);HE染色观察动物胰腺和视网膜病理变化,并检测视网膜厚度和视网膜神经节细胞(RGC)数;TUNEL染色观察视网膜细胞凋亡情况并计算凋亡指数。免疫组织化学方法检测小鼠视网膜组织中VEGFA,VEGFB,VEGFR2和GFAP的表达。结果与空白对照组相比,小鼠造模后血糖、TNF-α,IL-1β,IL-6,IL-18,NF-κB和TXB2水平均显著升高(P<0.05),胰岛素C肽和6-keto-PGF1α水平均显著降低(P<0.01),胰岛及视网膜组织损伤较重,小鼠视网膜厚度明显变薄,RGCs数量明显下降(P<0.01)。与模型对照组相比,中药复方制剂ig给药能显著降低血糖、TNF-α,IL-1β,IL-6,IL-18,NF-κB和TXB2水平(P<0.05),升高胰岛素C肽和6-keto-PGF1α水平(P<0.05);HE染色结果显示,中药复方制剂给药后小鼠胰腺内可见体积较大、数量较多的胰岛组织散在分布,胰岛数量高于模型对照组;与模型对照组比较,各给药组眼内各结构相关形态变化得到有效改善,视网膜神经节细胞层内的RGC数量明显增多,视网膜厚度明显增加(P<0.05)。各剂量中药复方组细胞凋亡指数显著降低(P<0.05);免疫组化结果显示,各剂量中药复方组不同程度减少视网膜组织中VEGFA,VEGFB,VEGFR2和GFAP的表达量。结论中药复方制剂的应用,证明了该组合物具有降血糖作用和视网膜保护作用,其作用机制可能与保护胰岛功能与形态、改善炎症反应、减少视网膜微血管损伤有关。
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