摘要

17β-羟基类固醇脱氢酶(17β-hydroxysteroid dehydrogenase, 17β-HSD)可将经胆固醇转化而成的雄烯二酮最终氧化为睾酮,对睾丸激素合成和雄性性状发育至关重要。本课题组前期研究发现17β-HSD3可能通过类固醇激素合成途径参与半番鸭(Cairina moschata)胚胎期性腺发育。本研究以半番鸭为研究对象,通过cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends, RACE)获得17β-HSD3基因全长cDNA序列,利用生物信息学对其序列特征和蛋白理化性质进行分析预测,并构建系统进化树;采用qPCR技术分析17β-HSD3基因在半番鸭胚胎期不同组织(脑,心,肝,肺,肌肉,性腺和肾)中的特异性表达以及在半番鸭、父本番鸭和母本北京鸭性腺中的差异表达。结果表明,半番鸭17β-HSD3基因全长cDNA序列全长为1 332 bp,含有1个963 bp的开放阅读框、1个26 bp的5’非编码区和1个343 bp的3’非编码区。编码的蛋白质含有320个氨基酸,该编码蛋白为不稳定性蛋白。同源性和进化树系统分析表明,半番鸭17β-HSD3基因与天鹅(Cygnus olor)亲缘关系最近,同源性高达96.5%。组织特异性表达分析显示,17β-HSD3基因在半番鸭性腺中的表达量极显著高于其他组织(P<0.01),同时,随着胚胎发育17β-HSD3基因表达量在半番鸭性腺组织中逐渐升高,表明该基因可能参与半番鸭性腺发育;17β-HSD3基因在繁殖性状正常的番鸭和北京鸭性腺中表达量显著高于不育的半番鸭(P<0.05),表明其表达可能与半番鸭的不育相关。本研究为进一步研究17β-HSD3基因对半番鸭性腺发育和生殖细胞分化的调控机理提供理论依据。