抑制差减杂交法克隆牙鲆变态早期差异表达的基因

作者：鲍宝龙; 杨桂梅; 施志仪; 任大明

来源：水产学报, 2006, (02): 204-210.

• 抑制差减杂交
• 牙鲆
• 变态早期
• 变态前
• 差异表达
• 相对定量RT-PCR suppression subtractive hybridization(SSH)
• Paralichthys olivaceus
• pro-metamorphos
• pre-metamorphosis
• differential expression
• relative quantative RT-PCR

为了克隆变态早期牙鲆头部差异表达的基因,采用抑制差减杂交法,以变态前的仔鱼头部表达的RNA作为驱动RNA,建立了牙鲆变态早期的差减cDNA文库,并利用相对定量RT-PCR对其进行了筛选。差减库的平均插入片段558bp左右,阳性率为81.8%。随机测定的45个克隆,在剔除假阳性克隆后,共得到22个不同的基因,其中13个为已知cDNA的同源基因,而另外9个为已知蛋白的同源基因,分别为prolactin receptor-like,COL1A1,M-3muscarinic receptor,Sfrs3,tropomyosin,ribosomal protein L27,ribosomal prote...