大鼠活化STAT蛋白抑制剂1基因重组腺病毒质粒的构建及鉴定

作者：陈平; 黄李雅; 袁耀宗

来源：中国生物制品学杂志, 2011, (04): 431-434+438.

DOI：10.13200/j.cjb.2011.04.64.chenp.007

• 活化STAT蛋白抑制剂1
• 重组腺病毒
• 克隆
• 分子 Protein inhibitor of activated STAT1(PIAS1)
• Recombinant adenovirus
• Cloning
• molecular

目的构建大鼠活化STAT蛋白抑制剂1(Protein inhibitor of activated STAT1,PIAS1)基因重组腺病毒质粒,并进行鉴定。方法应用RT-PCR法从大鼠胰腺腺泡细胞AR42J细胞株中扩增全长PIAS1基因,经T-A克隆后,亚克隆至穿梭质粒pDC316中,利用同源重组将腺病毒骨架质粒Nad5/F35和穿梭质粒pDC316-PIAS1共转染293细胞,获得重组腺病毒质粒Ad5/F35-PIAS1,经包装和扩增后,获得重组腺病毒。RT-PCR检测PIAS1基因的表达;荧光显微镜观察病毒感染情况;Western blot检测PIAS1蛋白的表达;并计算重组腺病毒的滴度。...

• 单位
  上海交通大学医学院附属瑞金医院