大鼠骨髓间充质干细胞体外培养与慢病毒转染方法的建立

作者：张红珊; 方建培; 苏浩彬; 杨旻

来源：中国实验血液学杂志, 2011, (06): 1472-1476.

• 骨髓间充质干细胞
• 慢病毒转染
• 贴壁培养法 bone marrow mesenchymal stem cell
• lentivirus transfection
• adherent culture

本研究建立大鼠骨髓间充质干细胞(BMMSC)体外分离培养、表型鉴定和标记的方法,为临床进行细胞移植治疗提供合格的细胞。无菌条件下取大鼠股骨、胫骨,用冲洗法冲出骨髓,贴壁培养法分离纯化BMMSC,体外扩增;流式细胞术进行免疫表型鉴定,并进行成骨,成脂分化鉴定;利用携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的慢病毒液转染大鼠BMMSC。结果表明,贴壁培养法能有效分离纯化大鼠BMMSC,细胞呈均一的成纤维细胞样;流式细胞术显示,第4代BMMSC中CD29、CD44表达阳性,CD34、CD45表达阴性。在相应的诱导培养条件下,BMMSC均能成骨及成脂分化。BMMSC用慢病毒液转染后表达GFP。结论:贴壁培养法简单...

• 单位
  中山大学孙逸仙纪念医院; 复旦大学附属儿科医院