复方生脉成骨胶囊修复激素性股骨头坏死的作用机制

作者：林天烨; 吴智明; 张文胜; 何晓铭; 何敏聪; 张庆文; 何伟; 魏秋实; 李子祺^*

来源：中国组织工程研究, 2023, 1-9.

• 激素性股骨头坏死
• 复方生脉成骨胶囊
• 岩藻糖基转移酶8
• 成骨
• 核心岩藻糖基化

背景：复方生脉成骨胶囊治疗早期激素性股骨头坏死的疗效佳，但具体治疗机制尚不完全明确。目的：观察复方生脉成骨胶囊干预对激素性股骨头坏死大鼠骨组织中岩藻糖基转移酶8、成骨基因及Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达的影响。方法：取60只雄性SD大鼠，采用随机数字表法分为空白组、模型组、中药低剂量组、中药中剂量组及中药高剂量组，每组12只。模型组和中药低、中、高剂量组通过皮下注射咪喹莫特(每2周一次，共2次)与臀肌注射甲强龙(1次/周，共4次)的方法建立激素性股骨头坏死模型，末次造模给药后第2天，中药低、中、高剂量组分别灌胃给予1.89,3.78,7.56 g/(kg·d)的复方生脉成骨胶囊溶液，模型组灌胃给予等量生理盐水，连续给药8周。给药结束后，分别进行股骨头micro-CT扫描、组织学染色、压缩实验、RT-qPCR及Western blot检测。结果与结论：(1)micro-CT扫描显示，与空白组比较，模型组大鼠骨小梁体积分数、骨小梁数量及骨小梁厚度减少(P <0.05)，骨小梁离散度增加(P <0.05)；与模型组比较，中药低、中、高剂量组骨小梁体积分数、骨小梁数量及骨小梁厚度增加(P <0.05)，骨小梁离散度减少(P <0.05)，且呈剂量依赖性。(2)苏木精-伊红染色显示，与模型组比较，中药低、中、高剂量组空骨陷窝率减少(P <0.05)，且呈剂量依赖性；免疫组化染色显示，与空白组比较，模型组岩藻糖基转移酶8、Runx2、骨形态发生蛋白2的蛋白表达降低(P <0.05)；与模型组比较，中药低、中、高剂量组岩藻糖基转移酶8、Runx2、骨形态发生蛋白2的蛋白表达升高(P <0.05)，且呈剂量依赖性。(3)压缩实验显示，与模型组相比，中药低、中、高剂量组股骨头最大载荷及弹性模量升高(P <0.05)，且呈剂量依赖性；(4)RT-qPCR及Western blot检测显示，与空白组相比，模型组岩藻糖基转移酶8、Runx2、碱性磷酸酶、骨钙素、成骨细胞特异性转录因子及骨形态发生蛋白2的mRNA与蛋白表达降低(P <0.05)；与模型组相比，中药低、中、高剂量组上述指标的mRNA与蛋白表达升高(P <0.05)，且呈剂量依赖性。与空白组比较，模型组Wnt2、低密度脂蛋白受体相关蛋白5及β-连环蛋白的mRNA与蛋白表达降低(P <0.05)，糖原合成酶激酶3β的mRNA与蛋白表达升高(P <0.05)；与模型组比较，中药低、中、高剂量组Wnt2、低密度脂蛋白受体相关蛋白5及β-连环蛋白的mRNA与蛋白表达升高(P <0.05)，糖原合成酶激酶3β的mRNA与蛋白表达降低(P <0.05)，且呈剂量依赖性。(5)结果表明，复方生脉成骨胶囊治疗激素性股骨头坏死的机制可能是通过上调岩藻糖基转移酶8表达来激活Wnt/β-catenin信号通路，促进骨形成。

• 单位
  广州中医药大学第三附属医院; 广州中医药大学; 第一临床医学院