Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1过表达抑制肺癌A549细胞的增殖和转移并克服其耐药

作者：翁旭; 阎优优; 童莹慧; 范云; 曾健梅; 王霖玲; 林能明

来源：中华肿瘤杂志, 2016, 38(06): 404-410.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0253-3766.2016.06.002

• 肺肿瘤
• A549细胞
• Keapl
• Nrf2
• 增殖
• 转移
• 抗药性,肿瘤

目的研究Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)/核转录因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路对肺癌A549细胞生长、转移和耐药的影响。方法利用慢病毒转染体系建立稳定过表达野生型Keap1的A549细胞株模型,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测Keap1过表达对A549细胞中Nrf2基因及其靶基因表达的影响。采用黄酰罗丹比色法、流式细胞术、克隆形成实验、Transwell侵袭实验、体外划痕实验等方法研究Keap1过表达对A549细胞生长、转移和耐药的影响。结果 Keap1过表达可引起A549细胞中Nrf2蛋白以及Nrf2靶基因mRNA的表达降低,并使A549细胞的增殖能力和克隆形成能力降低。Keap1过表达可使A549细胞阻滞于G0/G1期,其中A549-Keap1细胞中G0/G1期细胞的比例为(80.2±5.9)%,明显高于A549-GFP细胞中G0/G1期细胞的比例[(67.1±0.9)%,P<0.05]。Keap1过表达可降低A549细胞的迁移和侵袭能力,A549-Keap1细胞的迁移率仅为(35.0±7.1)%,明显低于A549-GFP细胞的迁移率[(52.5±10.6)%,P<0.05];A549-Keap1细胞的侵袭数量为(156.33±17.37)个/高倍视野,明显低于A549-GFP细胞的侵袭数量[(306.67±22.19)个/高倍视野,P<0.05]。过表达Keap1的A549细胞对卡铂和吉西他滨的敏感性增加,其中卡铂对A549-GFP细胞的IC50为(107.8±12.9)μmol/L,对A549-Keap1细胞的IC50为(52.1±3.3)μmol/L,差异有统计学意义(P<0.01);吉西他滨对A549-GFP细胞的IC50为(9.9±0.5)μmol/L,对A549-Keap1细胞的IC50为(6.8±1.2)μmol/L,差异亦有统计学意义(P<0.01)。结论 Keap1过表达影响肺癌A549细胞中Nrf2和下游靶基因的表达,抑制肿瘤细胞的增殖和转移,增加细胞对化疗药物的敏感性。

• 单位
  杭州市第一人民医院; 浙江中医药大学; 浙江省肿瘤医院