无乳链球菌GlnR因子DNA结合位点预测及其突变基因的构建

作者：夏杰; 易弋; 王佳; 杨军; 黄稀; 黄翠姬; 伍时华

来源：湖北农业科学, 2013, (23): 5902-5905.

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2013.23.009

• 无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)
• glnR
• DNA结合位点
• 重叠PCR
• 生物信息学 Streptococcus agalactiae
• glnR
• DNA binding sites
• overlap PCR
• bioinformatics

利用生物信息学的方法对无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)GlnR因子与DNA结合的位点进行预测,筛选出GlnR因子中与DNA结合的关键位点的氨基酸残基R47和R48。然后利用重叠PCR的方法将glnR基因上的第139~144位上的碱基CGCCGC突变为GCGGCG,使其编码的2个精氨酸残基突变为丙氨酸残基,将突变基因片段TA克隆至PMD18-T载体上进行测序验证。测序结果表明,利用重叠PCR成功突变了这6个碱基,为后续研究GlnR因子的突变位点对DNA结合的影响提供了参考。

• 单位
  柳州市渔业技术推广站; 广西科技大学